Лечение заболеваний кожи




Роль Toll-подобных рецепторов в патогенезе и лечении заболеваний  кожи.

Journal of Investigative Dermatology (2005) 125


Джейми E Макинтарф , Роберт Л  Модлин  и Дженни Ким.


Отдел дерматологии, CHS Дэвид Геффен школы медицины при Калифорнийском университете, Лос-Анджелес, Калифорния, США. Кафедра микробиологии и иммунологии, CHS Дэвид Геффен школы медицины при Калифорнийском университете, Лос-Анджелес, Калифорния, США.

Корреспонденция: Дженни Ким, доктор медицинских наук, отдел дерматологии,  CHS, Дэвид Геффен школы медицины при Калифорнийском университете.

Поступила в редакцию 25 февраля 2004 года; после доработки 30 июня 2004 года;

Принято 2 июля 2004.


Абстракт:


Toll-подобные рецепторы (TLR) являются ключевыми структурами   врожденного иммунного ответа  на микробную инвазию. Эти рецепторы  экспрессируются  на клетках иммунной системы, таких  как моноциты, макрофаги, дендритные клетки  и гранулоциты.  Необходимо отметить, что TLR  экспрессируются  не только в  клетках  периферической крови.  Их экспрессия  была  продемонстрирована  в эпителии дыхательных  путей и эпителии кожи - важных  пунктах  взаимодействия   микро и макроорганизма.


Клетки-носители TLR способны  распознавать постоянные патоген – ассоциированные молекулярные паттерны  (PAMP) , такие как липополисахариды микробов  и нуклеотидные  участки, содержащие  CpG-мотивы (цитозин-гуанин) в составе ДНК микробов и вирусов.  Активация TLR стимулирует сигнальные пути, которые приводят к экспрессии генов иммунного ответа  и продукции цитокинов. TLR играют важную роль  в запуске, как врождённого иммунного ответа, так и влияют на  адаптивный иммунитет, регулируемый  экспрессией  TLR,  при  таких заболеваниях  как  проказа, акне, псориаз, и могут  играть важную роль в патофизиологии этих заболеваний. Кроме того, поскольку TLR являются жизненно важными элементами  в инфекционно-воспалительных заболеваниях, они были определены в качестве потенциальной мишени для  терапевтического воздействия.  Действительно, уже созданы   синтетические агонисты TLR, такие как имиквимод , для лечения вирусных поражений и рака кожи. В будущем представляется  возможным создание препаратов, способных блокировать активацию TLR  и, следовательно, TLR-зависимые  воспалительные реакции, предоставляя  новые возможности для лечения воспалительных заболеваний.


Ключевые слова:  врожденный иммунитет, кожа, TLR


Сокращения: DC- дендритные клетки, LC- клетки Лангерганса, LPS-  ЛПС; TLR - Toll-подобный рецептор.


В ответ на воздействия болезнетворных микроорганизмов, организм использует  врожденное и адаптивное звено  иммунной системы для защиты от инфекции. Врожденный иммунный ответ  включает  физические барьеры, такие как кожа и эпителий слизистой как способ избежать инфекции, и быстрый клеточный ответ, реализуемый дендритными клетками (ДК), моноцитами, натуральными киллерами, гранулоцитами и эпителиальными клетки для защиты от повторного инфицирования. Эти клетки экспрессируют рецепторы распознавания , которые опосредуют ответ на 

патоген-связанные молекулярные модели (PAMP), которые встречаются у микроорганизмов. Человеческие Toll-подобные рецепторы (TLR) являются одним из таких семейств рецепторов распознавания   способных  инициировать врожденные иммунные реакции, влияющие  на последующий адаптивный  иммунный ответ. (Medzhitov и др., 1997). В настоящее время известны  десять TLR экспрессируемых клетками человека, и для многих из них определены  их микробные лиганды. К лигандам относятся  молекулы всегда присутствующие в микробах, такие как бактериальные компоненты клеточной стенки. В частности, TLR4 опосредует ответы организма на  бактериальные липополисахариды (ЛПС) грамотрицательных бактерий, таких как кишечная палочка, в то время как TLR2 опосредует ответы на пептидогликаны из грамположительных бактерий, таких как золотистый стафилококк (Полторак и др., 1998; Yoshimura и соавт, 1999). Кроме того, TLR2 / 1 гетеродимеры являются посредниками в ответах  на три-ацилированные липопротеины, а  TLR2 / 6 гетеродимеры – посредники в ответах на ди-ацилированные липопротеины (Brightbillи др., 1999; Ozinsky и др., 2000).

Однако не все TLR опосредуют врожденные ответы на компоненты клеточной стенки бактерий. Например, TLR9  отвечает на неметилированный CpG (цитозин-фосфогуанин) ДНК обнаруженный в бактериальных геномах, в то время как TLR3  отвечает на вирусную двухцепочечной РНК ( Hemmi и др. , 2000 ; Alexopoulou и др. , 2001 ). Кроме того, TLR5  опосредует ответ на бактериальный флагеллин. А одноцепочечная  РНК была определена в качестве лиганда для TLR8 у человека, и у мышей для TLR7 (Hayashi и др., 2001; Diebold и др., 2004; Heil и др.,2004).

 

 

 

 

TLR являются трансмембранными белками с внеклеточной частью, содержащей  множественные повторы лейцина, в то время как внутриклеточная часть структуры гомологична  цитоплазматическому домену IL-1 рецепторов.   Когда в результате экспозиции лиганда TLR активируются, то их внутриклеточные области  вызывают ответ по MyD88 зависимому  пути, который, в конечном итоге, приводит к  транслокации ядерного фактора транскрипции NF-kB  контролирующего экспрессию генов иммунного ответа.

При MyD88-зависимой сигнализации, MyD88 взаимодействует с рецептором Toll/IL-1 (TIR) домена цитоплазматической части TLR (Medzhitov и др., 1998). Это взаимодействие облегчает затем  MyD88 совместно с IL-1 рецептором связанной  киназы (IRAK), серин-треонин киназы, которая, в свою очередь, активирует фактор некроза опухоли TNF α, фактор некроза 6 (TRAF6) ( Suzuki и др.2002).  TRAF6 может затем активировать комплекс IKK, что приводит к фосфорилированию и последующей  деградации I B. После IB убиквитирования и деградации, транскрипционный факторNF B доступен для ядерной транслокации (Woronicz и др., 1997). Хотя как важный компонент во врождённом иммунном ответе, MyD88 не всегда требуется для распознавания некоторых микробных лигандов, и не все реакции  с TLR является полностью MyD88зависимыми (рис. 2).  Существует ряд доказательств, что TLR3 и TLR4 также могут  вызвать ответ по MyD88-независимому  пути, который включает в себя IRF-3 и  в конечном счете производит к усилению синтеза интерферона (ИФН) - . Последующие исследования показали, что TLR4-опосредованная  активация IRF-3 включает в себя адаптер белков TRIF и TRAM. Кроме того, TRIF также оказалась опосредованная TLR3-зависимая активация IRF-3, но TRIF что также показано посредничает в TLR3-зависимой MyD88 независимой активации NF B через TRAF6. Кроме того, Есть другие рецепторы, которые независимо от MyD88 распознают консервативные, повторяющиеся паттерны микроорганизмов (PAMP). К ним относятся Nod1 и NOD2 внутриклеточные рецепторы для пептидогликана, которые независимо от TLR и MyD88 активируют NFB (Жирарден и др., 2003а, б; Inohara и Нуньес, 2003).

 

 

 

Последствия активации  TLR

Активация TLR способствует воспалительной реакции. Активация NF B обеспечивает транскрипцию  иммуномодулирующих генов, в том числе генов различных цитокинов и хемокинов. Продукция цитокинов и хемокинов в свою очередь вызывает воспаление за счет иммобилизации иммунных клеток и активации антимикробной защиты. Хотя это помогает в  избавлении от инфекции, но воспаление, вызываемое  активацией  TLR,  может  вызывать повреждение тканей хозяина или развитию септического шока. Активация TLR также приводит к фагоцитозу патогенов клетками хозяина. Через TLR, как было показано в образце фагосомального содержимого, стимулируется  выработка воспалительных цитокинов после активации TLR  лигандами в фагосоме (Андерхилл и др., 1999). Совсем с недавно было показано, что TLR активация  способствует  интернализации патогенов и созреванию фагосом (Blander и Medzhitov, 2004). Механизм  TLR- индуцированного фагоцитоза  реализуется посредством участия  MyD88, IRAK4 и р38, в результате чего осуществляется положительная регуляция  рецепторов-мусорщиков. Таким образом, активация TLR способствует фагоцитозу патогенных микроорганизмов, и усилению  фагосомального  компонента воспалительной реакции, что приводит к созреванию фагосом,  способствующему  уничтожению фагоцитированых бактерий.

Еще одним следствием активации TLR является запуск прямого антимикробного пути, который способствует освобождению неспецифических антибактериальных молекул, таких как антимикробные пептиды. Например,  основные эпителиальные клетки дыхательных путей человека демонстрируют повышение производства - дефенсина-2 в ответ на стимуляцию TLR2 .  ЛПС также стимулирует рост-дефенсина-2 экспрессии трахеобронхиального эпителия (Becker и др., 2000; Герци др., 2003; Wang и др. др., 2003).  Кроме того, при стимуляция в пробирке  культуры клеток  эпидермиса с ЛПС было показано,  увеличение производства кератиноцитами  человека -дефенсина-2 мРНК в 4 раза. ( Chadebech et al , 2003 ). Интересно, что синтез  антимикробных  пептидов  не только индуцируется  через TLR, но и сами пептиды могут активировать клетки через TLR. Например, мышиный-дефенсин-2, как было показано, активирует дендритные клетки через TLR4 (Biragyn и др., 2002). Таким образом, активация TLR может содействовать производству антимикробных пептидов, а  освобождение этих пептидов может  дополнительно активировать TLR. Важно отметить, что активация TLR также может привести к синтезу активных форм кислорода и азота что помогает в уничтожении внутриклеточных патогенов, таких как микобактерии туберкулеза у мышей (Тома-Uszynski и др., 2001). Кроме того, активация TLR облегчает и направляет развитие адаптивного иммунного ответа. Один из путей облегчения TLR адаптивного иммунного ответа  – повышение уровня экспрессии костимулирующих молекул, таких как CD80 и CD86 на дендритных клетках, что позволяет дендритным клеткам более эффективно активировать Т-клетки (Цудзи и др., 2000;Michelsen и др., 2001)

Другое направление влияния TLR активации адаптивного иммунитета лежит через производство и высвобождение цитокинов. Важный аспект продукции цитокинов состоит  в том, что синтезируемые специфические цитокины  способствуют  дифференцировке  Т-клеток в Th -1 или  Th -2  субпопуляции, которые определяют  тип адаптивного иммунного  ответа хозяина  против возбудителя. Например, человеческие моноцитарные дендритные клетки стимулированные  липопептидом от М. туберкулеза, секретируют ИЛ-12 больше чем Ил-10, что приводит к сдвигу адаптивного иммунного ответа хозяина в сторону Th-1 , характеризующегося  клеточным, цитотоксическим Т-клеточным ответом (Тома-Uszynski и др., 2000). В отличие от активации адаптивного, Th 2 иммунного ответа  через  цитокины  IL-10 и Ил-4 ,характеризующегося участием В-клеток и антител. Таким образом, активация TLR на дендритных клетках служит не только для активации врожденного иммунного ответа на патоген, но и определяет структуру последующего адаптивного иммунного ответа организма. Активация TLR приводит также к апоптозу клеток. ЛПС  вызывают апоптоз клеток через  TLR 4 ( Choi et al , 1998 ). Кроме того, липопротеины  М. туберкулёза  массой до 19 кДа  вызвают  апоптоз  макрофагов.  Активация TLR2 / 6  микоплазменными липопротеинами  также вызвает  апоптоз клетки. Активация TLR 2 бактериальными липопротеинами даёт сигнал к апоптозу  через через MyD88,  белковые «домены смерти» Fas-рецепторов , каспазу 8. Важно отметить, что индукция апоптоза в инфицированных клетках через лиганды TLR может помочь  в устранении инфекции.

 

 

Экспрессия  толл-подобных рецепторов в коже.

Как упоминалось ранее, TLR экспрессируются различными клетками врожденной иммунной системы, такими как моноциты, макрофаги, дендритные клетки, и гранулоциты. Более того, так как TLR являются основными структурами  в ответе на врожденные патогены, экспрессия и функционирование TLR,  на участках взаимодействия организм - патоген имеет решающее значение для защиты организма. Это позволяет распознавать патогены, прежде чем они попадут в кровяное русло и ткани внутренних органов. Это действительно имеет место, так как  TLR экспрессия  была продемонстрирована в эпителиальных клетках  дыхательных путей и кишечника. Учетом того кожа является еще одним важным барьером в организме, препятствующим   микробной  агрессии, представляется логичным, что кожа также должна  экспрессировать  TLR чтобы  выполнять свою работу  барьера для инфекции. В одном исследовании было  показано, что нормальные кератиноциты экспрессируют TLR1 , 2 и 5 (Бейкер и др., 2003). В этом  исследовании были  использованы  пефорационная  биопсия из  участков  нормальной кожи у пациентов с псориазом  и нормальной кожи груди полученной  от доноров, не имеющих известных заболеваний кожи. Методом меченных антител показана экспрессия цитоплазматических TLR 1 и TLR 2 во всех слоях эпидермиса, с более  выраженной экспрессией TLR 2 в базальных  кератиноцитах. В базальном слое  выявлялась также экспрессия TLR 5. Таким образом,  оказывается, что кератиноциты в разных слоях эпидермиса, могут экспрессировать  различные  TLR. Так зрелые кератиноциты по мере их продвижения от базального слоя к поверхности кожи, могут изменять тип экспрессируемых  TLR . Другие исследования демонстрируют, экспрессию  TLR4 в кератиноцитах.  Pivarcsi  и др. (2003) показали  наличие  TLR2 и TLR4  по увеличению экспрессии  мРНК и  белков  в культивируемых человеческих кератиноцитах эпидермиса полученных из кожи здоровых людей. Кроме того,  окрашивание антителами различных слоёв кожи  показало  наличие экспрессии  TLR2 и TLR4 во всех слоях эпидермиса. Следует отметить, что найденные  Pivarcsi и др.,  TLR4 подтверждают раннее  исследование, в котором использованы культивированные человеческие кератиноцитов полученные  из крайней плоти. Song и др. (2002) обнаружили TLR4 зависимое усиление синтеза  мРНК методом  нозерн-блоттинга  и количественной ПЦР, и это увеличение  экспрессии  TLR4 ,  произошло  в ответ на стимуляцию ЛПС. Кроме того, методом поточной цитометрии и  реакцией иммунного окрашивания  моноклональными  антителами к TLR,  выявлена поверхностная экспрессия TLR кератиноцитами. Более того, эта группа методов  продемонстрировала, что индуцированная липополисахаридом экспрессия   IL-8  этими кератиноцитами,  былаTLR4 зависимой. Совсем недавно Mempel и др. (2003) сообщил, что культивированные первичные человеческие кератиноциты экспрессировали TLR1, 2,3,5 и 9, а TLR4, 6,7 и 8 не были  обнаружены. Эти противоречивые данные делают неясным, могут ли кератиноциты конституционально экспрессировать TLR4. Поэтому представляются необходимыми  дополнительные исследования, чтобы прояснить экспрессию в TLR кератиноцитах.

 

 

 

Эффекты активации TLR в кератиноцитах.

Исследования с кератиноцитами не только продемонстрировали экспрессию ими TLR, но они также показали способность кератиноцитов активировать врожденный иммунный ответ  посредством  своих  TLR. Стимулированная  Candida Albicans или убитыми  нагреванием микобактериями туберкулёза культура кератиноцитов,  которые  процессируют  стимулирующие TLR молекулы, усиленно  индуцирует NF κ  B,  что убеждает  в способности  кератиноцитов  к запуску TLR-опосредованного ответа (Pivarcsi и др., 2003). Кроме того, Mempel др. обнаружили стимуляцию кератиноцитов золотистым стафилококком, вызвающую  транслокацию NF κ B и последующее увеличение производства IL-8 и INOS (индуцибельной NO-синтетазы). Этот  воспалительный ответ  оказался  TLR2 зависимым (Mempel и др., 2003). Таким образом, TLR не просто представлены на кератиноцитах,  но активно участвуют в  защите  кожи, запуская NF κ B активацию  и, следовательно, продукцию цитокинов и хемокинов. Индукция хемокинов и цитокинов посредством активации TLR способствует иммобилизации иммунных клеток из сосудистой циркуляции к участкам инфекции, таким  как кожа, и модуляции иммунного поведения клетки. TLR-активированные кератиноциты также способны модулировать адаптивный иммунный ответ организма.  Lebre и др. (2003) показали, что супернатанты TLR -стимулированных кератиноцитов индуцируют созревание незрелых моноцитарных дендритных клеток человека. Эти, теперь уже зрелые, дендритные клетки способны  содействовать дифференцировке наивных Т-клеток в  Th 1 хелперы. Таким образом, кератиноциты могут влиять на развитие Th 1 и Th 2 адаптивного иммунного ответа к  кожным патогенным микроорганизмам. Кроме того, это говорит о том, что кератиноциты, путём активации, дендритных клеток, могут играть важную роль в воспалении опосредованом Т-клетками кожи. Таким образом, кератиноциты играют динамичную роль в защите хозяина, которая выходит за рамки их роли как физического барьера. Кератиноциты, как было показано, продуцируют  цитокины  и антимикробные пептиды, мобилизуют  нейтрофилы, и убивают микробов , таких как С. Albicans .  Теперь видно, что многие из этих способностей возможны благодаря  активизации их TLR.

 

TLR- экспрессия : когда чем меньше, тем лучше.

Хотя TLR экспрессия  в местах взаимодействия организма с  патогеном   вероятно, служит для защиты организма,  необязательно,  что  иммунный ответ на бактерии -  комменсалы  может повредить  ему. Эта концепция иллюстрируется исследования экспрессии TLR клетками Лангерганса (LC), уникальными дендритные клетками, найденными в эпидермисе. В отличие от дендритных клеток , LC, как было показано, по-разному реагируют на микробные  TLR лиганды. Так, например, LPS (липополисахарид)  способен индуцировать созревание дендритных клеток, но не LC (клеток Лангерганса). Более того, стимуляции ЛПС приводит к  появлению маркеров  CD80, CD86 и HLA-DR дендритных клеток, а не LС.  Одна  группа исследователей  сообщает об этой относительной невосприимчивости LC к снижению уровня TLR экспрессии на LC (Takeuchi и др., 2003).

Более конкретно, эта группа не смогла обнаружить мРНК индуцированной TLR4 в LC, а количество мРНК, индуцированной  TLR2, найдено в LC было явно меньше, чем найдено  в DC. Авторы предлагают, что  уменьшение TLR экспрессии  клетками Лангерганса (LC)  найденными в коже, по сравнению с  дендритными клетками,  может объяснить, почему  бактерии-комменсалы  не вызывают непрерывные воспалительные реакции в коже. Совсем недавно другая группа также продемонстрировала различия в экспрессии и активации  TLR  между LC и дендритными клетками (Мицуи и др., 2004). LC, как было обнаружено, имели более низкий уровень индуцированной TLR4 на поверхности, по сравнению с  дендритными клетками, и в отличие от дендритных клеток их уровень индуцированной TLR4 экспрессии  не повышался  после стимуляции ЛПС. Кроме того, их стимуляция  лигандами для TLR2, 4 и 9 вызывало созревание  дендритных клеток селезенки, но не клеток Лангерганса (LС). Взятые вместе, эти результаты показывают, что различия в экспрессии и активации TLR на клетках Лангерганса  потенциально может объяснить, почему   бактерии-комменсалы  не  вызвают непрерывное  воспаление  кожи, однако, больше число исследований  о роли TLR на клетках Лангерганса  было бы  оправданным, прежде чем эта теория сможет считаться фактом.

TLR и заболевания кожи.

Юношеские угри.

Вульгарные угри клинически характеризуются не воспалительными комедонами и воспалительными папулами, пустулами, и узелками. Гистологической картина воспалительного поражения представлена фолликулярными разрывами, нейтрофильной  и лимфоцитарной инфильтрацией  тканей, окружающих волосяные фолликулы, и потенциальной возможностью образования шрама. При воспалительных акне, грамположительные микробы Propionibacterium способствуют воспалению, вызывая секрецию цитокинов, а также выбросы веществ, таких как протеазы и гиалуронидазу, которые способствуют повреждению тканей. Исследования нашей лаборатории показали, что Propionibacterium acne вызывает высвобождение  Ил-12 и ИЛ-8  из  моноцитов человека , которые могут играть важную роль в воспалительных акне, а также исследования на ген-дефектных мышах также показали, что этот воспалительный ответ опосредован TLR2.  (Ким и др., 2002). Важно отметить, что экспрессия TLR2  была также продемонстрирована в биоптатах  акне, особенно в перифолликулярных областях, и количество обнаруженных TLR2-позитивных клеток увеличивалось с увеличением возраста поражения. Продемонстрированная  экспрессия TLR2 на месте болезни показывает, что воспаление,  индуцированное  посредством  TLR2,  играет важную роль в патогенезе акне.

Псориаз.

Псориаз это хроническое воспалительное заболевание кожи опосредованное Т-клетками , клинически характеризующееся   гиперпролиферацией эпидермиса (Бейкер и др., 1984; Хаммар и др., 1984). Это заболевание неизвестной этиологии, хотя некоторые микроорганизмы были  определены  как триггеры, способные инициировать или усугублять заболевание (Розенберг и др., 1994;Канда и др., 2002; Перес-Лоренцо и др., 2003). Исходя из этих предположений, были продолжены исследования модуляции TLR при псориазе. В одном исследовании сравнивали экспрессию TLR в биоптатах  поврежденных и не поврежденных участках  кожи  разгибателей предплечий  у пациентов с  не леченным  хроническим псориазом   и каплевидным псориазом  (Бейкер и др., 2003). Существенных различий в экспрессии  TLR найдено не было. Исследователи, однако, отметить, что экспрессия TLR2 оказалась более сильно выражена в верхних слоях эпидермиса больных псориазом, но в базальных слоях нормальной и не поврежденной кожи. В тоже время экспрессия TLR 5 уменьшилась  в повреждённых  базальных кератиноцитах, по сравнению с нормальной кожей. Другая группа исследователей обнаружила, что псориатические   базальные кератиноциты кожи продемонстрировали сильную и диффузную экспрессию TLR1 (Карри и др., 2003). Поскольку псориатические поражения характеризуются  эпидермальным утолщением и митотической активностью над  базальным слоем клеток, эти результаты позволяют предположить, что различия в экспрессии TLR  при  псориатических повреждениях по сравнению с нормальной кожей можно объяснить различиями возрасте и зрелости кератиноцитов в соответствующих слоях.  Так как пролиферации кератиноцитов при псориазе происходит выше базального слоя, то клетки в верхних слоях эпидермиса могут быть моложе и иметь менее зрелый фенотип в отношении экспрессии TLR. Кроме того, различная  экспрессия TLR в разных слоях эпидермиса, возможно, играет  функциональную  роль в реализации иммунной защиты  кожи. Важно отметить, что эти тонкие различия в экспрессии  TLR  псориатических поражений кожи,  еще не были связаны с этиологией или патогенезом этого заболевания.

 

TLR, как объект терапевтического воздействия.

Лечение вирусных заболеваний кожи.

Imidazoquinolones (имидазоквиналон), имиквимод  и R-848, изначально были разработаны для использования в качестве аналогов нуклеозидов (типа ацикловир, прим. переводчика). Эти соединения не имеют, однако, нуклеозид-подобной активности, а вместо этого  использовались, как модификаторы иммунного ответа. Imiquimod был определен как лиганд для  TLR7 макрофагов, способный активировать   NF κ  B  (нуклеарный фактор каппа ) через MyD88-зависимый путь  (Hemmi и др., 2002). В результате, Imidazoquinolones вызывает производство нескольких цитокинов, в том числе интерферона альфа, фактора некроза опухоли (ФНО) – α  и ИЛ-12 p40 в моноцитах периферической крови, макрофагах и дендритных клетках (Гибсон и др., 1995). Эти цитокины,  индуцированные  имиквимодом, могут затем влиять на врожденный  и адаптивный  иммунный ответ. Ранние исследования по имиквимоду сосредоточены на его способности индуцировать синтез ИФН- α (интерферон  -  α). Так как ИФН- α, как полагают, защищает клетки от вирусных инфекций, многие исследования были направлены на антивирусные свойства препарата. Анти-вирусная активность была впервые продемонстрирована на морских свинках инфицированных ВПГ-2. Морским свинкам, заражённым  ВПГ-2, вводили  имиквимод интравагинально по 5 г, и  показали снижение вагинальной репликации вируса и меньшее количество рецидивов инфекции (Харрисон и др., 1988). Дальнейшие исследования показали, что  предположительно, один из механизмов  наблюдаемых антивирусных эффектов  препарата,   имиквимод, состоит в повышении  количества  Т-клеток памяти, к вирусу (Harrison и др., 1994). В ретроспективе, это открытие может быть связано с тем, что TLR-активация увеличивает экспрессию костимулирующих молекул дендритными клетками, что позволяет им, более эффективно активировать Т-клетки. Интересно, что, несмотря на все исследования, проведенные с имиквимодом  и ВПГ-2, имиквимод редко используется для лечения ВПГ-2 инфекции у людей. Вместо этого, американским управлением  контроля   качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов (FDA) препарат был одобрен для лечения аногенитальной ВПЧ-инфекции. В одном рандомизированном контролируемом исследовании рассмотрены биопсии кожи пациентов ВПЧ обработанных 5% кремом имиквимод  (Tyring и др., 1998). Изучение биопсии участка  кожи, излеченного от бородавки, выявило повышение в нём  ИФН- α, ИФН- β, IFN- γ и TNF- α , мРНК,  а также снижение вирусной ДНК и РНК.  Эти результаты означают, что повышенный клеточный Th 1 (Т1-хелперный)  ответ может быть причиной  исчезновения  папиллом,  этот Th-1 ответ может быть следствием  вызванных имиквимодом  продукции цитокинов, и, таким образом, TLR7 активации. Таким образом, были предложены несколько потенциальных механизмов эффективности имиквимода в лечении вирусных инфекций. Применение 1% крема  имиквимода  на кожу безволосых мышей продемонстрировали увеличение  транскрипции IFN- α  в обработанной коже, что указывает, что  ИФН- α  может действовать локально, как антивирусный  агент (Imbertson и др., 1998).  Imiquimod  способствует созреванию и миграции  клеток Лангерганса (LC)  к  регионарным лимфатическим узлам, а также подавляет производство IL-4 и ИЛ-5 в  мононуклеарных клетках периферической крови, тем самым подавляя развитие Th 2 адаптивного иммунного ответа (Вагнер и др., 1999; Бернс Jr и др., 2000; Suzuki и др., 2000). Дополнительно имиквимод вызывает продукцию Ил-12 , что способствует усилению Th 1 адаптивного иммунного ответа,  необходимого для уничтожения внутриклеточных патогенов, таких как вирусы (Гибсон и др., 1995). Поскольку производство цитокинов и преобладание  Th 1 или  Th 2  типа  адаптивного иммунного ответа  является  результатом  активации TLR, похоже, что многие из иммуномодулирующих свойств,  продемонстрированных  имиквимодом,  обусловлены  активацией TLR7.  Так как другие лиганды TLR, такие как липопротеины и ЛПС продемонстрировали способность индуцировать апоптоз, то он (апоптоз)  может быть одним из механизмов, ответственных за эффективность  имиквимода (Мейер и др., 2003). Однако точный механизм   противовирусной активности имиквимода у людей, не известен.

Лечение злокачественных образований кожи.

В дополнение к лечению вирусных инфекций кожи, в последнее время появились исследования, которые изучающие  эффективность имиквимода для лечения рака кожи и предраковых поражений. Есть исследования и отчеты, что  5% крем  имиквимода  оказался эффективным при лечении базально-клеточной  карциномы, актинического кератоза, болезни Боуэна, и злокачественного лентиго  (Бианки и др., 2003а, б; Чен и Shumack, 2003; Giannotti и др., 2003; Нейлор и др., 2003; Stockfleth и др., 2003).

Кроме того, было показано, что другие лиганды TLR такие как  CpG  (мотив цитозин-гуанин фрагментов ДНК)  для  (TLR9)  и таксол для  (TLR4) ,  убивают опухолевые клетки и используются для лечения других видов рака таких как меланома (Byrd-Лейфер и др., 2001; Wang и др., 2002; Лонсдорф и др., 2003;Krieg, 2004). Поскольку клеточный иммунный ответ играет роль в подавлении и развития и роста  раковых опухолей, не удивительно, что модификатор иммунного ответа такой как имиквимод может быть использован для лечения раковых заболеваний. Хотя еще слишком рано, чтобы считать, что это безопасная и эффективная альтернатива другим проверенным  методам лечения, однако, эти исследования подчеркивают, что возможности применения иммуномодуляторов,  которые действуют через TLR, являются широкими и многообещающими.

Выводы:

TLR имеют решающее значение во  врожденном иммунном ответе на микробную инвазию. Эти рецепторы экспрессируются иммунными клетками, такими как моноциты, макрофаги, дендритные клетки, и гранулоциты,  в местах взаимодействия  организма с  патогенами,  такими как эпителий дыхательных путей и кожи. Клетки организма экспрессирующие  TLR,  способны распознавать  консервативные (постоянно присутствующие в микробах) патоген связанные молекулярные модели (PAMP патоген-ассоциированные молекулярные паттерны) и  активация TLR запускает  сигнальные  пути, которые приводят к экспрессии генов иммунного ответа и продукции цитокинов. Модели (паттерны) синтеза  цитокинов могут  определять  тип  адаптивного иммунного ответа, который организм  будет использоваться для борьбы с возбудителем. Как TLR играют важную роль в  запуске и  врождённого и адаптивного иммунного ответа, регуляция экспрессии TLR при таких болезнях, как проказа, угревая сыпь, псориаз  может играть важную роль в патофизиологии этих заболеваний. В некоторых случаях, например при проказе, модуляция экспрессии и активации  TLR  может защищать  и уменьшать тяжесть заболевания. Кроме того, распознавание  Propionibacterium acne, бактерий-комменсалов, при помощи  TLR2 вызывает синтез  воспалительных цитокинов, которые могут играть роль в патогенезе заболевания. Поэтому TLR являются жизненно важными в развитии инфекционно-воспалительных заболеваний, что делает их потенциальной терапевтической мишенью. В самом деле, способность TLR бороться с болезнями уже была использована посредством разработки лекарств, которые действуют как агонисты TLR . На сегодняшний день, синтетические агонисты TLR, такие  как имиквимод , нашли применение для лечения вирусных патогенов и рака кожи. Следовательно, представляется возможным, что в будущем могут быть созданы препараты способные блокировать TLR –зависимые  воспалительные реакции, и будут созданы новые возможности для лечения воспалительных заболеваний, таких как акне и псориаз. Открытие TLR и разработка препаратов, которые воздействуют на них,  оказывают влияние на наше понимание и лечение ряда кожных заболеваний. Несмотря на их важность, однако, относительно мало исследований по изучению роли TLR в коже. Наличие TLR на кератиноцитах  и их способность к дифференцированной экспрессии в разных слоях эпидермиса, пока не до конца понятны. Кроме того, в дополнение к своей роли в инфекционных заболеваниях кожи, TLR могут играть важную роль в воспалительных заболеваниях кожи, таких как угревая сыпь, псориаз, атопический дерматит, красный плоский лишай, красная волчанка, что делает эту область перспективной и открытой  для будущих исследований.

 



Создан 29 мар 2014



  Комментарии       
Имя или Email


При указании email на него будут отправляться ответы
Как имя будет использована первая часть email до @
Сам email нигде не отображается!
Зарегистрируйтесь, чтобы писать под своим ником
 

Недорого и современные услуги дизайнера интерьера по квартирамм, офисам, домам (ЖМИ на ссылку): http://boligolovv.io.ua/s935735/kakie_travy_pri_cistite_pit_i_prinimat._konsultaciya 

Яндекс.Метрика